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rip之后跑qpcr,RIP实验工作原理

跑qpcr内参是不是变化很小 2023-08-28 13:14 804 墨鱼
跑qpcr内参是不是变化很小

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RIP(RNA免疫沉淀)拉出的RNA理论上没有内参基因,输入的%是怎么计算的? 点赞、回复、转发、点赞、收藏,看昨晚的原海报2021-09-1420:29:11我记得sigma公司有一个case1.RIPi用于研究circRNA和蛋白质之间的相互作用图3Circ-Foxo3在细胞周期进展中的作用(来自[2]图4RIP和qPCR检测揭示了circ-Foxo3和蛋白质p之间的关系)21和CDK2(来自[2]本研究,通过p21和CDK2等

详情参见原始数据excel表:RIP-QPCR数据2.3直方图阳性对照:结果说明:阳性对照实验:U1C蛋白免疫共沉淀,qPCR检测RNAU1的量。 阴性对照为IgG蛋白共免疫沉淀,qPCR检测RNAU1含量。 图:在RIP实验过程中,我们制定了一系列的质量控制标准来保证实验每一步的真实性和有效性,例如抗体和蛋白表达的WB检测,以及最终产品的qTR-PCR检测的gelrun。 具体例子如下图所示:WB检测抗体的作用和RNA结合蛋白的表达。 安息吧-

RIP(RNA共免疫沉淀)属于后者,利用特异性抗体捕获样品中的目标蛋白,然后与目标蛋白结合的RNA也被捕获,然后通过qPCR或测序技术来测定这些结合的RNA。 联系技术支持1892。我不知道用哪一步来计算体积,因为我们的试剂盒一开始都是一样的,然后inpu被分成0.1ml,而hip和igga都是0.8

˙ω˙ B.研究m6A是否通过调节mRNA的稳定性和降解来影响靶基因蛋白质水平:研究m6A对靶基因mRNA水平的影响-RT-qPCR、RNA-seqC.研究m6A是否调节RNA的核输出(Nuclearexport)影响实验简介RIP(RNA结合蛋白免疫沉淀)是研究RNA与蛋白质在体内结合的技术,主要包括RIP-qPCR和RIP-seq;其中,RIP-qPCR用于验证目标蛋白与已知RNA的结合,RIP-seq用于筛选与目标蛋白结合的未知RNA

╯0╰ 1.RIP-qPCR实验步骤1.细胞提取将细胞提取物配制成相应浓度的蛋白溶液。 2.预处理时添加RNA酶抑制剂,减少RNA降解。 3.与RNA结合的抗体将特异性抗体添加到预处理的细胞提取物中1.将细胞液解冻并在17000*g4°C下离心10分钟。 取10ul裂解液上清液输入,80℃冷冻,最后与RIP产物一起提取RNA。 将100ul上清液移至900ul与抗体复合的ProteinA/G食品中,4°C

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标签: RIP实验工作原理

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